基于真实世界数据挖掘及实验探讨酒精性肝病肝郁脾虚证的用药规律及作用机制
目的:基于真实世界数据,探究中医药治疗酒精性肝病肝郁脾虚证的用药规律,分析核心药物可能的作用机制,并通过体外实验进行验证。方法:筛选酒精性肝病肝郁脾虚证患者处方信息,建立数据库,使用Microsoft Excel 2019、IBM SPSS Statistics 22.0和SPSS Molder 18.0软件进行频数统计、性味归经统计、关联规则和聚类分析,筛选出核心药物。应用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获取核心药物的有效成分及靶点,GeneCards数据库获取酒精性肝病疾病靶点,应用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分-靶点”网络,应用String平台进行PPI网络分析,应用Metascape平台进行基因本体(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用MTT法筛选核心药物最佳干预浓度,将大鼠肝星状细胞(HSC-T6)分为正常对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,采用不同浓度含药培养基对酒精诱导活化后的HSC-T6细胞进行干预,MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测各组HSC-T6细胞中α-SMA mRNA、Col-1 mRNA及Col-3 mRNA的表达水平及PI3K/Akt信号通路中PI3K mRNA、Akt mRNA的表达水平。结果:治疗酒精性肝病肝郁脾虚证中药药性以寒、温为主,药味以甘、苦、辛味为主,归经以肝、胃经为主。共获得27组关联药物,药物聚类6组。根据药物应用频数筛选核心药物为白术、黄芪、泽兰、茯苓。有效成分共26种,药物与疾病共同靶点100个。GO分析获得生物过程239个,细胞成分33个,分子功能126个,KEGG通路富集分析主要与PI3K/Akt信号通路、JAK/STAT信号通路、NF-κB信号通路等有关。MTT结果显示,低剂量组、中剂量组、高剂量组均能抑制酒精诱导的HSC-T6细胞活化增殖(P0.05)。RT-PCR结果显示,低、中、高剂量组能够显著下调酒精诱导活化的HSC-T6细胞中α-SMA mRNA、Col-1 mRNA、Col-3 mRNA、PI3K mRNA及Akt mRNA表达水平(P0.05)。结论:治疗酒精性肝病肝郁脾虚证的核心药物组合“白术-黄芪-泽兰-茯苓”能够通过调控PI3K/Akt信号通路抑制酒精性肝病进展。
中医药导报
2025年05期
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